實驗原理 :

（1）公司產品僅用于科研特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。

（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。

（3）結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，參與免疫應答。

（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
商品詳情：
英文名稱：NEDD4

別    名:Cell proliferation-inducing gene 53 protein; E3 ubiquitin protein ligase Nedd4; E3 ubiquitin-protein ligase NEDD4; KIAA0093; NEDD 4; NEDD-4; Nedd4; NEDD4_HUMAN; Neural precursor cell expressed developmentally down regulated 4; Neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4.

研究領域:細胞生物  神經生物學  信號轉導  細胞周期蛋白  細胞分化

抗體來源:Rabbit

克隆類型:Polyclonal

交叉反應:Human, Rat,  (predicted: Mouse, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, )

產品應用:WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=3ug/test ICC=1:100-500 IF=1:100-500 （石蠟切片需做抗原修復）

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理論分子量:145kDa

細胞定位:細胞漿 細胞膜

性    狀:Liquid

濃    度:1mg/ml

免 疫 原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human SRD5A2: 801-900/1319

亞    型:IgG

純化方法:affinity purified by Protein A

緩 沖 液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事項:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

Function:

E3 ubiquitin-protein ligase which accepts ubiquitin from an E2 ubiquitin-conjugating enzyme in the form of a thioester and then directly transfers the ubiquitin to targeted substrates. Involved in the pathway leading to the degradation of VEGFR-2/KDFR, independently of its ubiquitin-ligase activity. Monoubiquitinates IGF1R at multiple sites, thus leading to receptor internalization and degradation in lysosomes. Ubiquitinates FGFR1, leading to receptor internalization and degradation in lysosomes. According to PubMed:18562292 the direct link between NEDD4 and PTEN regulation through polyubiquitination described in PubMed:17218260 is questionable. Involved in ubiquitination of ERBB4 intracellular domain E4ICD. Involved in the budding of many viruses. Part of a signaling complex composed of NEDD4, RAP2A and TNIK which regulates neuronal dendrite extension and arborization during development. Ubiquitinates TNK2 and regulates EGF-induced degradation of EGFR and TNF2.

商品屬性：

抗體的標記實驗要點：

1.如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性；

6.還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及基,也可與糖基共價結合；

7.交聯反應后,應充分透析,否則,殘余的會對化抗體與親和素的結合產生競爭作用；

8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
一抗和二抗的區(qū)別：

第一抗體就是平常所說的抗體，即能和抗原特異性結合。

第二抗體是能和抗體結合的，即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。

一抗是針對抗原的抗體，二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體。也就是說，抗原進入機體刺激機體免疫系統(tǒng)產生免疫應答，由B細胞可以產生與相應抗原發(fā)生特異性結合的特殊蛋白質。

一抗二抗都是一種可以特異結合別的物質的基團，而且一抗可以至少結合兩種其他基團（底物和二抗）。

一抗：可以特異結合底物，就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結合與否用肉眼是看不出來的。

二抗：可以和一抗結合，并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團），作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團），則不需要二抗。但這樣成本很高，因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設計一般是二抗帶上可檢測標記，再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣，當一抗結合到底物上，就可以通過二抗檢測出來。

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