?ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
人腮腺炎病毒IgM )elisa檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):Human paramyxovirus parotitis IgM ELISA Kit產(chǎn)品別名:人人腮腺炎病毒IgM elisa試劑盒用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱(chēng):人腮腺炎病毒IgM elisa檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng): Human paramyxovirus parotitis IgM ELISA Kit
規(guī)格 :48T/96T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
標(biāo)本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時(shí)或4oC 過(guò)夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱(chēng)重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨,該過(guò)程需在冰上進(jìn)行(有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理(超聲破碎過(guò)程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測(cè)。
4、其它生物標(biāo)本:請(qǐng)1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行生產(chǎn),已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào),只要客戶(hù)提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿(mǎn)足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或凝固不全等;
控制方法:采血時(shí)規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標(biāo)本時(shí)采用無(wú)菌試管,經(jīng)檢測(cè)后再低溫凍存;保存時(shí)間不宜過(guò)久,檢測(cè)時(shí)盡量采用新鮮標(biāo)本;對(duì)于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
公司采用全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無(wú)效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
以下是人腮腺炎病毒IgM elisa檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
體液肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試盒LTB(Human heat-labile enterotoxin B subunit) ELISA Kit 人不耐熱腸素B亞單位
細(xì)胞PTEN活性定比色法定量檢測(cè)試盒CT(Human Chlamydia trachomatis) ELISA Kit 人沙眼衣原體抗體
組織PTEN活性定比色法定量檢測(cè)試盒Human schistosoma ELISA Kit 人血吸蟲(chóng)
細(xì)胞酸激酶(PK)總活性比色法定量檢測(cè)試盒RV Ag(Human Rotavirus antigen) ELISA Kit 人輪狀病抗原
組織酸激酶(PK)總活性比色法定量檢測(cè)試盒LP Ag(Human Legionella pneumophila antigen) ELISA Kit 人軍團(tuán)菌抗原
細(xì)胞酸果糖激酶(PHOSPHOFRUCTOKINASE)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試盒Human colicin ELISA Kit 人大腸菌素
組織酸果糖激酶(PHOSPHOFRUCTOKINASE)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試盒ADV-Ag(Human Adenovirus Antigen) ELISA Kit 人腺病抗原
細(xì)胞己糖激酶(HEXOKINASE)酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒Human Trichinella antibody ELISA Kit 人旋毛蟲(chóng)抗體
組織己糖激酶(HEXOKINASE)酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試盒Human Tetanus Antibody ELISA Kit 人破傷風(fēng)抗體
細(xì)胞甘油二脂酰激酶(DAG KINASE)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試盒Human Lebtospira IgM ELISA Kit 人鉤端螺旋體IgM
人腮腺炎病毒IgM elisa檢測(cè)試劑盒組織甘油二脂酰激酶(DAG KINASE)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試盒Lep IgG(Human Leptospira IgG) ELISA Kit 人鉤端螺旋體IgG
細(xì)胞葡萄糖激酶(glucose kinase)比色法定量檢測(cè)試盒Human Amebiasis ELISA Kit 人阿米巴
組織葡萄糖激酶(glucose kinase)比色法定量檢測(cè)試盒Human Diphtheria antibody ELISA Kit 人白喉抗體
血液葡萄糖激酶(glucose kinase)比色法定量檢測(cè)試盒CYT Ab(Human Cysticercosis antybody) ELISA Kit 人囊蟲(chóng)病抗體
細(xì)胞Akt1/PKBa激酶活性定量檢測(cè)試盒(A/B/C)Brucella Ab IgG(Human Brucella Antibody IgG) ELISA Kit 人布魯氏菌抗體IgGCanine C3(Complement 3) ELISA Kit
Canine C3(Complement 3) ELISA KitZNF3英文名稱(chēng):TTBK1化細(xì)絲蛋白A體 英文名稱(chēng):AVSD2黑皮質(zhì)3受體體
化學(xué),固相合成, (3AR,7AS)-REL-八-1H-異吲哚
SERPINA12英文名稱(chēng):Tenascin CG蛋白α抗體
英文名稱(chēng):CKAP2Menin抑癌蛋白體
化學(xué),合成試, 3--2-羧
SIRT4英文名稱(chēng):TFF3G蛋白β樣蛋白抗體 C6orf25英文名稱(chēng):CARD10人踝蛋白(talin)免疫試盒
英文名稱(chēng):CHMP4B+CHMP4C錯(cuò)配修復(fù)蛋白3體
化學(xué),固相合成, 二硫烷
C6orf35英文名稱(chēng):CARD15人花生四烯5脂氧合酶(ALOX5/LOG5)免疫試盒
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